Kit de détection des mutations du gène EGFR humain 29 (PCR en fluorescence) - RUO

Description courte :

[Code produit] HWTS-TM4008

Description courte

Ce kit est utilisé pour la détection qualitative in vitro des mutations courantes dans les exons 18 à 21 du gène EGFR dans des échantillons provenant de patients atteints de cancer du poumon non à petites cellules (voir tableau 1 pour plus de détails).

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Kit de détection des mutations du gène EGFR humain 29 (PCR en fluorescence) - RUO

Épidémiologie

Le cancer du poumon est devenu la première cause de mortalité par cancer dans le monde, constituant une grave menace pour la santé humaine. Le cancer du poumon non à petites cellules représente environ 80 à 85 % des cas. L'EGFR est actuellement la cible moléculaire la plus importante pour le traitement de ce cancer. La phosphorylation de l'EGFR peut favoriser la croissance, la différenciation, l'invasion et la métastase des cellules tumorales, ainsi que l'apoptose et l'angiogenèse tumorale. Les inhibiteurs de tyrosine kinase de l'EGFR (ITK-EGFR) bloquent la voie de signalisation de l'EGFR en inhibant son autophosphorylation, inhibant ainsi la prolifération et la différenciation des cellules tumorales, induisant leur apoptose et réduisant l'angiogenèse tumorale, permettant ainsi une thérapie ciblée [1]. De nombreuses études ont montré que l'efficacité thérapeutique des ITK-EGFR est étroitement liée au statut mutationnel du gène EGFR et qu'ils peuvent inhiber spécifiquement la croissance des cellules tumorales porteuses de mutations de ce gène [2,3]. Le gène EGFR est situé sur le bras court du chromosome 7 (7p12), mesure 200 kb et comprend 28 exons. La région de mutation se situe principalement dans les exons 18 à 21. La délétion des codons 746 à 753 de l'exon 19 représente environ 45 % des mutations, et la mutation L858R de l'exon 21, environ 40 à 45 % [4]. Les recommandations du NCCN pour le diagnostic et le traitement du cancer du poumon non à petites cellules stipulent clairement que la recherche de mutations du gène EGFR est obligatoire avant l'administration d'un inhibiteur de tyrosine kinase de l'EGFR (EGFR-TKI). Ce kit de test permet d'orienter l'administration de ces inhibiteurs et constitue le fondement d'une médecine personnalisée pour les patients atteints de cancer du poumon non à petites cellules. Ce kit est exclusivement destiné à la détection des mutations fréquentes du gène EGFR chez ces patients. Les résultats de ces tests sont fournis à titre indicatif uniquement et ne doivent pas servir de seul fondement à la prise en charge individualisée des patients. Les cliniciens doivent tenir compte de l'état du patient, des indications médicamenteuses et du traitement en cours. La réaction, les autres indicateurs des analyses de laboratoire et d'autres facteurs sont utilisés pour une interprétation globale des résultats.

Canal

Tampon de réaction Canal
Tampon de réaction EGFR IC Chaîne FAM
Tampon de réaction L858R Chaîne FAM
Tampon de réaction 19del Chaîne FAM
Tampon de réaction T790M Chaîne FAM
Tampon de réaction G719X Chaîne FAM
Tampon de réaction 3Ins20 Chaîne FAM
Tampon de réaction L861Q Chaîne FAM
Tampon de réaction S768I Chaîne FAM

Paramètres techniques

Stockage Liquide : ≤ -18 °C À l'abri de la lumière
durée de conservation 12 mois
Type de spécimen tissu tumoral frais, coupe histologique congelée, tissu ou coupe histologique inclus en paraffine, plasma ou sérum
CV <5,0%
LoD La détection de la solution de réaction d'acide nucléique dans un contexte de 3 ng/μL de type sauvage peut détecter de manière stable un taux de mutation de 1 % ;

b) réaction d'acide nucléique Sous un taux de mutation de 1 %, une mutation de 1×103 copies/mL peut être détectée de manière stable dans le contexte de type sauvage de 1×105 copies/mL ;

c) La solution de réaction de référence interne permet de détecter le produit de référence SW3 avec la limite de détection la plus basse de la référence interne de l'entreprise. Lorsque le kit détecte le matériau de référence de limite de détection nationale, le matériau de référence de limite de détection de fréquence de mutation de 2,5 % et la mutation d'amplification du gène EGFR avec une variation du nombre de copies de 4 peuvent être détectés de manière stable.

Spécificité Il n'y a pas de réactivité croisée avec l'ADN génomique humain de type sauvage et d'autres types mutants
Instruments applicables Systèmes PCR en temps réel Applied Biosystems 7500,

Systèmes PCR en temps réel Applied Biosystems 7300,

Systèmes PCR en temps réel QuantStudio® 5,

Système de PCR en temps réel LightCycler® 480,

Système PCR en temps réel BioRad CFX96.

 

Flux de travail

Kit de détection des mutations du gène EGFR humain 29 (PCR par fluorescence)-RUO (2)

 

Réactifs nécessaires mais non fournis :Eau exempte de DNase/RNase, éthanol anhydre. Pour l'analyse d'échantillons de tissus inclus en paraffine, il est recommandé d'utiliser le kit QIAamp DNA FFPE Tissue (56404) de QIAGEN et le kit d'extraction rapide d'ADN pour tissus inclus en paraffine (DP330) de Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. Pour l'analyse d'échantillons de plasma/sérum, il est recommandé d'utiliser le kit Macro & Micro-Test General DNA/RNA (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (compatible avec l'extracteur automatique d'acides nucléiques Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) de Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. ou le kit QIAamp Circulating Nucleic Acid (55114) de QIAGEN.

Consommables nécessaires mais non fournis: Embouts sans DNase/RNase, gants jetables, tube à centrifuger sans DNase/RNase, barrettes de 8 tubes pour PCR, centrifugeuse.


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