Gène de résistance aux carbapénèmes (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nom du produit
Kit de détection du gène de résistance aux carbapénèmes HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR par fluorescence)
Épidémiologie
Les carbapénèmes sont des antibiotiques bêta-lactamines atypiques possédant le spectre antibactérien le plus large et la plus forte activité antibactérienne. Grâce à leur stabilité aux bêta-lactamases et à leur faible toxicité, ils sont devenus l'un des médicaments antibactériens les plus importants pour le traitement des infections bactériennes sévères. Les carbapénèmes sont très stables aux bêta-lactamases à spectre étendu (BLSE) d'origine plasmidique, aux chromosomes et aux céphalosporinases d'origine plasmidique (enzymes AmpC).
Canal
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| Famille | LUTIN | VIM |
| VIC/HEX | Contrôle interne | Contrôle interne |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Paramètres techniques
| Stockage | ≤-18℃ |
| Durée de conservation | 12 mois |
| Type de spécimen | Expectorations, colonies pures, écouvillon rectal |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤ 5,0 % |
| Niveau de détail | 103UFC/mL |
| Spécificité | a) Le kit détecte les références négatives standardisées de l'entreprise et les résultats répondent aux exigences des références correspondantes. b) Les résultats du test de réactivité croisée montrent que ce kit n'a pas de réaction croisée avec d'autres agents pathogènes respiratoires, tels que Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, Adénovirus respiratoire, Enterococcus, ou des échantillons contenant d'autres gènes résistants aux médicaments CTX, mecA, SME, SHV, TEM, etc. c) Anti-interférence : la mucine, la minocycline, la gentamicine, la clindamycine, l'imipénème, la céfopérazone, le méropénème, le chlorhydrate de ciprofloxacine, la lévofloxacine, l'acide clavulanique, la roxithromycine sont sélectionnés pour le test d'interférence, et les résultats montrent que les substances interférentes mentionnées ci-dessus n'ont pas de réaction interférente à la détection des gènes de résistance aux carbapénèmes KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM et IMP. |
| Instruments applicables | Systèmes PCR en temps réel Applied Biosystems 7500 Systèmes PCR en temps réel QuantStudio®5 Systèmes PCR en temps réel SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Système PCR en temps réel LightCycler®480 Système de détection PCR en temps réel LineGene 9600 Plus (FQD-96A，Hangzhou(technologie Bioer) Cycleur thermique quantitatif en temps réel MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Système PCR en temps réel BioRad CFX96 Système PCR en temps réel BioRad CFX Opus 96 |
Flux de travail
Option 1.
Réactif d'extraction recommandé : Kit ADN/ARN général Macro & Micro-Test (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (qui peut être utilisé avec l'extracteur automatique d'acide nucléique Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) de Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Ajouter 200 μL de solution saline normale au précipité de thalle. Les étapes suivantes doivent suivre les instructions d'extraction, et le volume d'élution recommandé est100 μL.
Option 2.
Réactif d'extraction recommandé : Réactif d'extraction ou de purification d'acide nucléique (YDP302) de Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. L'extraction doit être démarrée en stricte conformité avec l'étape 2 du mode d'emploi (ajouter 200 µl de tampon GA au précipité de thalle et agiter jusqu'à ce que le thalle soit complètement en suspension). Utiliser de l'eau exempte de RNase/DNase pour l'élution, et le volume d'élution recommandé est de 100 µl.
Option 3.
Réactif d'extraction recommandé : Réactif de libération d'échantillon pour macro-tests et micro-tests. L'échantillon d'expectorations doit être lavé en ajoutant 1 ml de sérum physiologique au précipité de thalle traité ci-dessus, puis centrifugé à 13 000 tr/min pendant 5 minutes. Le surnageant est éliminé (conserver 10 à 20 µl de surnageant). Pour les colonies pures et les écouvillons rectaux, ajouter 50 µl de réactif de libération d'échantillon directement au précipité de thalle traité ci-dessus, puis les étapes suivantes doivent être extraites conformément au mode d'emploi.
