Gène de résistance aux carbapénèmes (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nom du produit
Kit de détection des gènes de résistance aux carbapénèmes HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR par fluorescence)
Épidémiologie
Les carbapénèmes sont des antibiotiques β-lactamines atypiques possédant le spectre antibactérien le plus large et la plus forte activité antibactérienne. Grâce à leur stabilité face aux β-lactamases et à leur faible toxicité, ils sont devenus des antibiotiques essentiels pour le traitement des infections bactériennes graves. Les carbapénèmes sont très stables face aux β-lactamases à spectre étendu (BLSE) plasmidiques, aux chromosomes et aux céphalosporinases plasmidiques (enzymes AmpC).
Canal
| Mélange PCR 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | LUTIN | VIM |
| VIC/HEX | Contrôle interne | Contrôle interne |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Paramètres techniques
| Stockage | ≤-18℃ |
| durée de conservation | 12 mois |
| Type de spécimen | Crachats, colonies pures, écouvillon rectal |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103UFC/mL |
| Spécificité | a) Le kit détecte les références négatives normalisées de l'entreprise et les résultats répondent aux exigences des références correspondantes. b) Les résultats du test de réactivité croisée montrent que ce kit ne présente aucune réaction croisée avec d'autres agents pathogènes respiratoires, tels que Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, l'adénovirus respiratoire, Enterococcus, ou des échantillons contenant d'autres gènes de résistance aux médicaments CTX, mecA, SME, SHV, TEM, etc. c) Anti-interférence : La mucine, la minocycline, la gentamicine, la clindamycine, l'imipénem, la céfopérazone, le méropénem, le chlorhydrate de ciprofloxacine, la lévofloxacine, l'acide clavulanique et la roxithromycine ont été sélectionnés pour le test d'interférence, et les résultats montrent que les substances interférentes susmentionnées n'ont aucune réaction interférente avec la détection des gènes de résistance aux carbapénèmes KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM et IMP. |
| Instruments applicables | Systèmes PCR en temps réel Applied Biosystems 7500 Systèmes PCR en temps réel QuantStudio®5 Systèmes PCR en temps réel SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Système PCR en temps réel LightCycler®480 Système de détection PCR en temps réel LineGene 9600 Plus (FQD-96A，HangzhouTechnologie Bioer) Cycleur thermique quantitatif en temps réel MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Système PCR en temps réel BioRad CFX96 Système PCR en temps réel BioRad CFX Opus 96 |
Flux de travail
Option 1.
Réactif d'extraction recommandé : Kit d'extraction d'ADN/ARN général Macro & Micro-Test (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (qui peut être utilisé avec l'extracteur automatique d'acides nucléiques Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B) de Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.). Ajouter 200 µL de solution saline physiologique au précipité de thalle. Les étapes suivantes doivent être réalisées conformément aux instructions d'extraction, et le volume d'élution recommandé est100 μL.
Option 2.
Réactif d'extraction recommandé : réactif d'extraction ou de purification d'acides nucléiques (YDP302) de Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. L'extraction doit être réalisée en suivant scrupuleusement l'étape 2 du mode d'emploi (ajouter 200 µL de tampon GA au précipité de thalle et agiter jusqu'à suspension complète du thalle). Utiliser de l'eau exempte de RNase/DNase pour l'élution, le volume d'élution recommandé étant de 100 µL.
Option 3.
Réactif d'extraction recommandé : Réactif de libération d'échantillon Macro & Micro-Test. L'échantillon d'expectorations doit être lavé en ajoutant 1 mL de solution saline physiologique au précipité de thalle traité mentionné ci-dessus, puis centrifugé à 13 000 tr/min pendant 5 minutes. Le surnageant est ensuite éliminé (conserver 10 à 20 µL de surnageant). Pour les colonies pures et les écouvillons rectaux, ajouter 50 µL de réactif de libération d'échantillon directement au précipité de thalle traité mentionné ci-dessus, et procéder aux étapes d'extraction suivantes conformément au mode d'emploi.
