Gène de résistance au carbapénème (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nom du produit
Kit de détection du gène de résistance aux carbapénèmes HWTS-OT045 (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR par fluorescence)
Épidémiologie
Les antibiotiques carbapénèmes sont des antibiotiques β-lactamines atypiques dotés du spectre antibactérien le plus large et de l'activité antibactérienne la plus forte.En raison de sa stabilité vis-à-vis de la β-lactamase et de sa faible toxicité, il est devenu l'un des médicaments antibactériens les plus importants pour le traitement des infections bactériennes graves.Les carbapénèmes sont très stables vis-à-vis des β-lactamases à spectre étendu (BLSE) à médiation plasmidique, des chromosomes et des céphalosporinases à médiation plasmidique (enzymes AmpC).
Canal
| PCR-Mélange 1 | PCR-Mélange 2 | |
| FAM | LUTIN | VIGUEUR |
| CIV/HEX | Contrôle interne | Contrôle interne |
| CY5 | NDM | CPK |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Paramètres techniques
| Stockage | ≤-18℃ |
| Durée de conservation | 12 mois |
| Type d'échantillon | Crachats, colonies pures, écouvillonnage rectal |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| LoD | 103UFC/ml |
| Spécificité | a) Le kit détecte les références négatives standardisées de l'entreprise et les résultats répondent aux exigences des références correspondantes. b) Les résultats du test de réactivité croisée montrent que ce kit n'a pas de réaction croisée avec d'autres pathogènes respiratoires, tels que Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, adénovirus respiratoire, Enterococcus ou des échantillons contenant d'autres gènes résistants aux médicaments CTX, mecA, SME, SHV, TEM, etc. c) Anti-interférence : la mucine, la minocycline, la gentamicine, la clindamycine, l'imipénem, la céfopérazone, le méropénem, le chlorhydrate de ciprofloxacine, la lévofloxacine, l'acide clavulanique, la roxithromycine sont sélectionnés pour le test d'interférence et les résultats montrent que les substances interférentes mentionnées ci-dessus n'ont aucune réaction interférente. à la détection des gènes de résistance aux carbapénèmes KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM et IMP. |
| Instruments applicables | Systèmes de PCR en temps réel Applied Biosystems 7500 Systèmes de PCR en temps réel QuantStudio®5 Systèmes PCR en temps réel SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Système PCR en temps réel LightCycler®480 Système de détection PCR en temps réel LineGene 9600 Plus (FQD-96A,HangzhouTechnologie Bioer) Cycleur thermique quantitatif en temps réel MA-6000 (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Système PCR en temps réel BioRad CFX96 Système de PCR en temps réel BioRad CFX Opus 96 |
Flux de travail
Option 1.
Réactif d'extraction recommandé : Kit Macro & Micro-Test General DNA/RNA (HWTS-3019-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (qui peut être utilisé avec l'extracteur automatique d'acide nucléique Macro & Micro-Test (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) de Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd. Ajoutez 200 μL de solution saline normale à le thalle précipite.Les étapes suivantes doivent suivre les instructions d'extraction et le volume d'élution recommandé est100μL.
Option 2.
Réactif d'extraction recommandé : Réactif d'extraction ou de purification d'acide nucléique (YDP302) de Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd. L'extraction doit être démarrée en stricte conformité avec l'étape 2 du mode d'emploi (ajouter 200 μL de tampon GA au précipité de thalle , et agiter jusqu'à ce que les thalles soient complètement suspendus).Utilisez de l'eau sans RNase/DNase pour l'élution et le volume d'élution recommandé est de 100 μL.
Option 3.
Réactif d'extraction recommandé : Réactif de libération d'échantillon pour macro et micro-test.L'échantillon d'expectoration doit être lavé en ajoutant 1 ml de solution saline normale au précipité de thalle traité mentionné ci-dessus, centrifugé à 13 000 tr/min pendant 5 minutes, et le surnageant est jeté (conserver 10 à 20 µL de surnageant).Pour les colonies pures et les écouvillons rectaux, ajoutez 50 µL de réactif de libération d'échantillon directement au précipité de thalle traité mentionné ci-dessus, et les étapes suivantes doivent être extraites conformément aux instructions d'utilisation.
